卫矛醇半固体生化管，y型管固体到液体还是

前几天，与朋友喝茶闲聊，他说堂弟家养了大鸡小鸡有10000多只，最近发现很多鸡开始排白色粪便，小鸡大鸡都出现死亡，找了个邻村家禽养殖好几年的内行帮他诊断，说是得了鸡白痢，花了一千多元，买了一大堆药准备给鸡吃，朋友问这些药行不行。没有到现场实地查看，也没有实验室检测鉴定，无法判断鸡得的是什么病，自然也就无法确定他买的药有没有作用。

在家禽养殖行业，百分之九十以上的是他这种情况，因知识、条件、技术、经验等因素所限，仅凭鸡的临床表现，不加综合鉴别鉴定，未经实验室检测验证，就进行确诊治疗，药用了一大堆，既不对因也不对症，稀里糊涂就用在了鸡的身上，歪打正着蒙对了的有点效果，多数是花了钱没治好病，导致产生耐药、菌群失衡、疾病泛滥。

朋友堂弟的鸡是不是得了鸡白痢暂且不论，这必须要进行实验室检测验证才能确诊，不是所为内行人看一眼嘴上随便一说是或不是。鸡白痢的病原是鸡白痢沙门氏菌，是鸡沙门氏菌病的一种，在此，科普一下鸡沙门氏菌病的相关知识，希望有益于农村创业家禽养殖的朋友们。

【概述】

鸡沙门氏菌病（鸡白痢、鸡伤寒、鸡副伤寒）是由肠杆菌科沙门氏菌属的某种（菌株）所引起的鸡的细菌性传染病。包括鸡白痢（PD）、鸡伤寒（FT）、鸡副伤寒（CP）。

鸡白痢是鸡白痢沙门氏菌引起的一种细菌性传染病。鸡伤寒是伤寒沙门氏菌感染引起的鸡的败血性传染病。鸡副伤寒是鸡副伤寒沙门氏菌感染引起的鸡的细菌性传染病。

【病原学】

鸡沙门氏菌病的病原沙门氏菌为肠杆菌科沙门氏菌属，革兰氏阴性杆菌，大小为0.6-0.9um×1-3um，不产生芽孢，一般无荚膜，能运动，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外，绝大多数有周身鞭毛。

该菌对外界的抵抗力较强。在自然水中不易繁殖，可生存2-3周。在自然土壤中能活数月。在冰冻土壤中能越冬。在冰箱中可生存3-4个月。在自然环境的粪便中可存活1-2个月。最适宜繁殖温度为37℃，在20℃以上即能大量繁殖。

该菌对热抵抗力不强。不耐热，在55℃下1小时或60℃下10-20分钟可被杀死。在5%的石炭酸中5分钟死亡。1:500升汞5分钟内即可将其杀灭。

生化特性：发酵葡萄糖、麦芽糖、卫芽糖、甘露醇及山梨醇产气。不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇。不产吲哚、V-P反应阴性、有赖氨酸脱羧酶。不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。

鸡伤寒沙门氏菌及部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气，大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖；除鸡白痢沙门氏菌、猪伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌和仙台沙门氏菌等外，均能利用枸橼酸盐。

沙门氏菌属按生化反应可分为4个亚属。亚属Ⅰ是生化反应典型的和最常见的沙门氏菌；亚属Ⅱ和Ⅳ是生化反应不典型的沙门氏菌；亚属Ⅲ是亚利桑那沙门氏菌。

培养特性：需氧及兼性厌氧菌。在普通琼脂培养基上生长良好，培养24小时后，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐的菌落，其菌落特征与大肠杆菌相似（无粪臭味）。在鉴别培养基（麦康凯、SS、伊红美蓝）一般无色菌落。三糖铁琼脂斜面，斜面为红色，底部变黑并产气。

血清学特性：沙门氏菌具有复杂的抗原结构，一般沙门氏菌具有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原（Vi) (荚膜或包膜抗原)三种抗原。

沙门氏菌按其抗原成分，可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。其中与人体疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌、乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌、丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌、丁组的伤寒杆菌和肠炎杆菌等。除伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌和副伤寒乙杆菌引起人类的疾病外，大多数仅能引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病，但有时也可污染人类的食物而引起食物中毒。

O抗原：为脂多糖，性质稳定。能耐100℃达数小时，不被乙醇或0.1%石炭酸破坏。决定O型原特异性的是脂多糖中的多糖侧链部分，以1、2、3等阿拉伯数字表示。乙型副伤寒杆菌有4、5、12三个。鼠伤寒杆菌有1、4、5、12四个；猪霍乱杆菌有6、7二个。其中有些O抗原是几种菌所共有，如4、5为乙型副伤寒杆菌和鼠伤寒杆菌共有，将具有共同O抗原沙门氏菌归为一组，这样可将沙门杆氏菌属分为a-z、o51-o63、o65-o67共有42组。我国已发现26个菌组、161个血清型。使人类致病的沙门氏杆菌大多属于a-e组。O抗原刺激机体主要产生IgM抗体。

Vi抗原：因与毒力有关而命名为vi抗原。由聚-n-乙酰-d-半乳糖胺糖醛酸组成。不稳定，经60℃加热、石碳酸处理或人工传代培养易破坏或丢失。新从病患者中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。vi抗原存在于细菌表面，可阻止O抗原与其相应抗体的反应。vi抗原的抗原性弱。当体内菌存在时可产生一定量抗体；细菌被清除后，抗体也随之消失。故测定vi抗体有助于对伤寒带菌者的检出。

沙门氏菌感染细胞机制：沙门氏菌在感染细胞时采用三步战略，首先，在自己的表面形成一个针状突起，以此建立和目标细胞之间的接触；然后，一些专门的蛋白质会通过这个突起抵达目标细胞，破坏目标细胞的细胞膜，打出一个洞；最后，沙门氏菌细胞通过这个洞口向目标细胞释放真正具有毒性的蛋白质。

H抗原：为蛋白质，对热不稳定，60℃经15分钟或乙醇处理被破坏。具有鞭毛的细菌经甲醇液固定后，其O抗原全部被H抗原遮盖，而不能与相应抗O抗体反应。H抗原的特异性取决于多肽链上氨基酸的排列顺序和空间构型。

沙门氏杆菌的H抗原有两种，称为第1相和第2相。第1相特异性高，又称特异相，用a、b、c等表示，第2相特异性低，为数种沙门氏杆菌所共有，也称非特异相，用1、2、3等表示。具有第1相和第2相h抗原的细菌称为双相菌，仅有一相者称单相菌。每一组沙门氏杆菌根据h抗原不同，可进一步分种或型。H抗原刺激机体主要产生IgG抗体。

【流行病学】

沙门氏菌属系人、畜、禽共患的食源性高致病菌，应尽量避免人、畜、禽频繁接触，以防人类中毒感染。鸡沙门氏菌病的流行病学有以下几个特点：

发病日龄；

鸡白痢：各种年龄的鸡均可发生，如种鸡场净化不好，雏鸡在胚胎期即感染。以14-21日龄以内雏鸡的发病率最高。

鸡伤寒：各种年龄的鸡均可发病，但以青年鸡和成年鸡多见，21日龄以下的鸡偶可发病。

鸡副伤寒：主要危害30日龄内的雏鸡，常在14日龄之内感染发病，6-10天达最高峰，30日龄以上的鸡有较强的抵抗力，一般不引起死亡。

传播途径：

鸡白痢：垂直传播是本病最常见的传播方式，病原菌也可通过污染的饲料、饮水及空气，经消化道、呼吸道引起同群鸡相继发病和传染。

鸡伤寒：本病主要通过消化道和眼结膜传播感染，也可经蛋垂直传播。

鸡副伤寒：主要是水平传播，鸡经卵巢直接传递并不多见。

传染源：恢复期患病鸡和无症状的隐性带菌鸡也是常见的传染源。

易感发病：各种品种的鸡对本病均有易感性。本病四季均可发生。

【临床症状】

鸡白痢：

雏鸡：精神萎顿，绒毛松乱，两翼下垂，缩头颈，闭眼昏睡，不原走动，拥挤在一起；病初饮食减少，而后停食，多数出现软嗉症状；下痢，排稀薄如桨湖状的白色粪便，肛门周围绒毛被粪便污染，有的因粪便干结封住肛门，影响排粪；引起肺炎时可见呼吸困难；引起关节炎时，关节肿胀变形，出现跛行或卧地不起；有时可引起全眼球炎，角膜混浊呈云雾状，失明；最后因呼吸困难及心力衰竭而死。

成年鸡：多呈慢性或隐性感染。一般不见明显的临床症状，有的感染鸡因卵黄囊炎引起腹膜炎，腹膜增生而出现垂腹现象。

鸡伤寒：

雏鸡：与雏鸡鸡白痢的临床症状相似。

成年鸡：突然停食，精神不振，嗜睡，翅膀下垂，羽毛松乱；渴欲增加，排出淡黄色或绿色粪便，下痢、消瘦，产蛋减少或停止；鸡冠及可视粘膜苍白；发生腹膜炎时，则表现一种与企鹅相似的直立姿势。

鸡副伤寒：

雏鸡：急性感染呈败血症经过，不显症状而突然死亡，y型管固体到液体还是，多数病例症状与雏鸡鸡白痢的临床症状相似，但饮水增加，水样泻痢。

成年鸡：多为慢性带菌鸡，不显症状。

【病理变化】

鸡白痢：

雏鸡剖检：肝脏表面有大量灰白色坏死点，有时坏死斑呈地图样；胆囊肿大充盈；脾脏肿胀、出血、坏死；肾充血或贫血；在心肌、肺、肝、盲肠、大肠及肌胃上有坏死灶或结节；盲肠中有干酪样物堵塞肠腔，有时还混有血液，肠壁增厚；卵黄吸收不良，其内容物色黄如油脂状或干酪样；常有腹膜炎。

慢性带菌的成年母鸡剖检：卵泡萎缩、变形、变性、变色，呈淡黄色、土黄色或污绿色；慢性心包炎；与卵巢相连的卵子常呈油脂或干酪样，卵黄膜增厚，长有长短粗细不一的卵蒂(柄状物)；脱落的卵子有的深藏在腹腔的脂肪性组织内，有的则自输卵管逆行而坠入腹腔或阻塞在输卵管内，引起广泛的腹膜炎及腹腔脏器粘连、腹水；在腹腔脂肪中或肌胃及肠壁上有时发现琥珀色干酪样小囊包。

成年公鸡剖检：常局限于睾丸及输精管。睾丸极度萎缩，同时出现小脓肿。输精管管腔增大，充满稠密的均质渗出物。

鸡伤寒：

青年鸡和成年鸡剖检：肝肿大，呈浅绿、棕色或青铜色，质脆，胆囊充盈膨大；心肌和肝有灰白色粟状坏死灶；心包炎；肺瘀血，呈灰色；腺胃粘膜易脱落；肌胃内角质膜易撕下；十二指肠溃疡最严重，整个肠道并扩展到盲肠，可见到少数直径为1mm-4mm的溃疡灶；

雏鸡剖检：肺、心、肌胃中有时可见到与雏鸡鸡白痢病变相似的病灶。

鸡副伤寒：

雏鸡剖检：消瘦、脱水；肝脏肿胀，淤血，出血，有暗红色与黄白色相间的条纹及针尖状出血点、白色坏死点或坏死灶，有时表面附有纤维素性渗出物；心包粘连；脾脏肿胀、有出血斑，坏死点或两种病变都存在；肺、肾出血；肠道有出血或坏死灶，盲肠内有干酪样栓子；胰腺有灰白色坏死灶。

成年鸡剖检：肝、脾、肾充血肿胀；有出血性或坏死性肠炎；心包炎；腹膜炎；输卵管的坏死和增生，卵巢的坏死及化脓。

【诊断鉴别】

原理是利用卫矛醇微量生化管对微量物质进行生化反应的实验方法。卫矛醇微量生化管是一种能够承受高温和高压的小型反应器，可以在微量级别上进行生化反应。该实验方法利用卫矛醇微量生化管的高温高压耐受性和微量反应的特性，将。

鸡沙门氏菌病的诊断，根据流行病学、临床症状、剖检病变等可作出初步诊断。

1、临床诊断鉴别

鸡白痢与鸡伤寒的鉴别

相同点：病原都是沙门氏菌属，均有冠髯苍白，羽毛蓬乱，病雏排白色稀便，肛门周围被粪便污染，发育不良，气喘，呼吸困难等临床症状。均有病雏心肌、肺、肌胃坏死灶等剖检病变。

鸡白痢与鸡副伤寒的鉴别

相同点：病原都是沙门氏菌属，均有冠髯苍白，羽毛蓬乱，病雏排白色稀便，肛门周围被粪便污染，发育不良，气喘，呼吸困难，病雏偎近热源，成鸡食欲不振，饮水增加，拉稀粪等临床症状。均有肺充血、有血性条纹，肝、脾、肾肿大等剖检病变。

不同点：鸡副伤寒不仅鸡易感，也可感染其他禽类、畜类和人。病鸡排水样粪，盲目和结膜炎，6-10日龄死亡最多，1月龄以上死亡少见。成年鸡多迅速恢复，死亡率不超过10%。剖检可见卵黄凝固，心包有粘边。火鸡常见十二指肠出血性炎症。成年母鸡以输卵管坏死性增生病变、卵巢化脓性坏死性病变为特征。

鸡伤寒与鸡副伤寒的鉴别

相同点：病原都是沙门氏菌属，均有精神倦怠，嗜眠呆立，垂头闭眼，两翼下垂，羽毛松乱，显著厌食，饮水增加，水泄样下痢，肛门粘有粪便，在靠近热源处拥挤在一起。

不同点：副伤寒雏鸡常有眼盲和结膜炎症状，一般不显外部症状。伤寒以青年鸡和成年鸡多见，21日龄以下的鸡偶可发病。副伤寒主要危害30日龄内的雏鸡感染发病，30日龄以上的鸡有较强的抵抗力，一般不引起死亡。鸡伤寒特征性病变是肝脏呈古铜色，肝脏表面及心肌上有栗粒状坏死灶；而鸡副伤寒肝、脾充血并有条纹状成针尖状出血和坏死灶。

鸡白痢与鸡曲霉菌病的鉴别

相同点：均在4-6日龄多发，第2-3周龄死亡率最高。均有精神不振，闭目缩颈，翅膀下垂，腹泻，气喘，呼吸困难等临床症状。

2、实验室诊断鉴别

实验室诊断鉴别的传统方法主要是根据形态学特征、培养特征、生理生化特征、抗原特征、噬菌体特征等。

鸡白痢沙门氏菌

形态特征：将纯培养物进行涂片染色镜检，可见革兰氏染色阴性较短而细小的两端稍圆的细长杆菌，大小为0.3-0.5um×1-2.5um，不运动、无荚膜，不形成芽孢。

生理特征：兼性厌氧。外界环境中不耐寒，不耐热，在沸水中立即死亡，但在蛋内需煮沸5min方可杀死，一般消毒剂在短时间内都能将其杀死。该菌仅感染鸡和火鸡，在病鸡的肝、肺、肠、卵黄囊、心及血液中含菌量最高。

培养特征：将纯培养物分别接种在普通琼脂、鲜血琼脂、麦康凯琼脂平板及普通肉汤中经37℃培养24小时，在普通琼脂平板上长出圆形、边缘整齐、湿润、稍隆起的光滑菌落；在血琼脂平板上菌落特点与普通琼脂平板上相同，无溶血现象；在麦康凯琼脂上生长出透明而稍带黄色的菌落，其大小、形状与鲜血平板相同；在普通肉汤中肉汤轻度混浊，管底有絮状沉淀，无菌膜及菌环。

鸡伤寒沙门氏菌

形态特征：将纯培养物进行涂片染色镜检，可见革兰氏染色阴性短粗的杆状，两端染色略深，大小为1.0-2.0um×1.5um，常单个散在，偶尔成对存在。

生理特征：需氧、兼性厌氧。在加热60℃10分钟、日光直射下几分钟即被杀死；0.1%石炭酸和1%高锰酸钾能在几分钟内将其杀死；2%的甲醛溶液可在1分钟内杀死。在某些条件下，如黑暗处的水中可存活20天；死于鸡伤寒的鸡，3个月后还能在其骨髓中分离到强毒力的鸡伤寒沙门氏菌。

培养特征：易在PH7.2的牛肉膏琼脂、牛肉浸液琼脂及其它培养基上生长，在37℃条件下生长最佳。在硒酸盐和四磺酸肉汤等选择培养基上能够生长，在麦康凯、亚硫酸铋、SS、去氧胆酸盐、去氧胆酸盐枸橼酸乳糖蔗糖和亮绿琼脂等鉴别培养基上都能生长。在营养琼脂上形成细小、湿润、圆形蓝灰色菌落，边缘整齐。在肉汤中生长形成絮状沉淀。

生化特性：与鸡白痢沙门氏菌相同。

抗原特征： O抗原为1，9，12，其O12的抗原性没有变异，这一点与鸡白痢沙门氏菌不同。

鸡副伤寒沙门氏菌

形态特征：将纯培养物进行涂片染色镜检，可见革兰氏染色阴性短杆菌，偶尔可形成短丝，大小为0.4-0.6um×1-3um，不产生芽胞，能运动，正常带有周鞭毛，但在自然条件下也可碰到带或不带鞭毛的不运动的变种。

培养特征：兼性厌氧菌。易于在普通肉汤或琼脂上生长，最佳培养温度为37℃。在密封玻璃安瓿半固体琼脂中的副伤寒沙门氏菌，在室温下保存40年仍有活力。在琼脂培养基上的典型菌落为圆形、稍隆起、闪光而边缘光滑。菌落大小为1-2mm，依分散的程度而定。有时可看到粗糙菌落。

生化特性：发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、山梨醇并产气；不发酵乳糖、蔗糖、杨苷、侧金盏花醇；通常发酵卫茅醇并产气；发酵或不发酵肌醇；不产吲哚；甲基红阳性；V-P阴性；通常不利用枸橼酸盐；硫化氢通常阳性；尿素不水解；明胶很少液化；氰化钾阴性；硝酸盐被还原；运动力阳性；赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性；精氨酸脱羧酶阳性但通常迟缓；苯丙氨酸脱氨酶阴性。没有以上特性的细菌不属于鸡副伤寒沙门氏菌，除非能证明它们带有已知沙门氏菌血清型的抗原。例如鼠伤寒沙门氏菌哥本哈根变种常引起鸽的副伤寒，但通常从鸽分离时不发酵麦芽糖，所以初次检查易与鸡白痢沙门氏菌混淆。

3、实验室检测鉴定

鸡沙门氏菌病（鸡白痢、鸡伤寒、鸡副伤寒）的病原学诊断，主要是取病料接种培养，对分离细菌进行形态学鉴定，通过生化试验、动物回归试验等手段确诊所分离细菌为沙门氏菌。按照国家NY/T541-2016标准规定的程序和要求进行诊断样品采集、保存、运送等；按照国家GB 4789.4-2016 标准规定的检测流程和血清学检测操作程序进行样品检测验证。最终确诊。

3-1 血液样品采集

用无菌操作方法采血，采血部位选择翅静脉采血或心脏采血。

禽翅静脉采血：压迫翅静脉近心端，使血管怒张，针头平行刺入静脉，放松对近心端的按压，缓慢抽取血液，或用针头刺破消毒过的翅静脉，将血液滴到直径3mm-4mm塑料管内，将一端封口。

雏禽心脏采血：针头平行颈椎从胸腔前口插入，见有血液回流时，即把针芯向外拉使血液流入采血器。

成年禽心脏采血：右侧卧保定时，在触及心搏动明显处，或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2处，垂直或稍向前方刺入2cm-3cm，见有血液回流即可采集。仰卧保定时，胸骨朝上，压迫嗉囊，露出胸前口，将针头沿其锁骨俯角刺入，顺着体中线方向水平刺入心脏，见有血液回流即可采集。

2-2 沙门氏菌检验程序

3-3 操作步骤

A、预增菌

无菌操作称取25g（mL）样品，置于盛有225mLBPW 的无菌均质杯或合适容器内，以8000r/min-10000r/min均质1min-2min，或置于盛有225mLBPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min-2min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需调整Ph，用1mol/mL 无菌NaOH 或HCl调pH 至6.8±0.2。无菌操作将样品转至500mL锥形瓶或其他合适容器内(如均质杯本身具有无孔盖，可不转移样品)，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h-18h。如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃-5℃不超过18h解冻。

B、增菌

轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL，转种于10mLTTB内，于42℃±1℃培养18h-24h。同时，另取1mL，转种于10mLSC内，于36℃±1℃培养18h-24h。

C、分离

分别用直径3mm的接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板（或HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板），于36℃±1℃分别培养40h-48h（BS琼脂平板）或18h-24h（XLD琼脂平板、HE琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板），观察各个平板上生长的菌落。

沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板菌落特征：

BS琼脂：菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。

HE琼脂：蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为黄色，中心黑色或几乎全黑色。

XLD 琼脂：菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。

D、生化试验

a、自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板，于36 ℃±1 ℃培养18h-24h，必要时可延长至48h。

在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内，沙门氏菌属的反应结果：

三糖铁琼脂：斜面产碱、底层产酸，产气（多数阳性，少数阴性），硫化氢（多数阳性，少数阴性）；赖氨酸脱羧酶试验培养基：阳性。初步判断为可疑沙门氏菌属。

三糖铁琼脂：斜面产碱、底层产酸，产气（多数阳性，少数阴性），硫化氢（多数阳性，少数阴性）；赖氨酸脱羧酶试验培养基：阴性。初步判断为可疑沙门氏菌属。

三糖铁琼脂：斜面产酸、底层产酸，产气（多数阳性，少数阴性），硫化氢（多数阳性，少数阴性）；赖氨酸脱羧酶试验培养基：阳性。初步判断为可疑沙门氏菌属。

b、接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时，可直接接种蛋白胨水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）培养基，也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于36℃±1℃培养18h-24h，必要时可延长至48h，按生化反应判定结果。将已挑菌落的平板储存于2℃-5℃或室温至少保留24h，以备必要时复查。

沙门氏菌属初步鉴别：

反应序号A1：硫化氢阳性、靛基质阴性、PH7.2尿素阴性、氰化钾阴性、赖氨酸脱羧酶阳性

反应序号A1：硫化氢阳性、靛基质阳性、PH7.2尿素阴性、氰化钾阴性、赖氨酸脱羧酶阳性

反应序号A1：硫化氢阴性、靛基质阴性、PH7.2尿素阴性、氰化钾阴性、赖氨酸脱羧酶阳性或阴性

ba、反应序号A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、氰化钾和赖氨酸脱羧酶3项中有1项异常，按下述可判定为沙门氏菌。如有2项异常为非沙门氏菌。

PH7.2尿素阴性、氰化钾阴性、赖氨酸脱羧酶阴性，判定结果为甲型副伤寒沙门氏菌（要求血清学鉴定结果）。

PH7.2尿素阴性、氰化钾阳性、赖氨酸脱羧酶阳性，判定结果为沙门氏菌IV或V（要求符合本群生化特性）。

PH7.2尿素阳性、氰化钾阴性、赖氨酸脱羧酶阳性，判定结果为沙门氏菌个别变体（要求血清学鉴定结果）。

bb、反应序号A2：补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质阳性变体两项试验结果均为阳性，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。

bc、反应序号A3：补做ONPG。ONPG 阴性为沙门氏菌，同时赖氨酸脱羧酶阳性，甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。

【别名】二去水卫矛醇;卫康醇 , 去水卫矛醇,脱水半乳糖醇,环氧乳醇【外文名】Dianhydrogalactitol 【适应症】对慢粒白血病有较好的近期疗效，缓解率86％对肺癌、发性骨髓瘤、鼻咽癌等也有定疗效，对各型肺癌的。

bd、必要时进行沙门氏菌生化群的鉴别。

沙门氏菌属各生化群的鉴别：

卫矛醇：I阳性、II阳性、III阴性、IV阴性、V阳性、VI阴性

山梨醇：I阳性、II阳性、III阳性、IV阳性、V阳性、VI阴性

水杨苷：I阴性、II阴性、III阴性、IV阳性、V阴性、VI阴性

ONPG：I阴性、II阴性、III阳性、IV阴性、V阳性、VI阴性

丙二酸盐：I阴性、II阳性、III阳性、IV阴性、V阴性、VI阴性

KCN：I阴性、II阴性、III阴性、IV阳性、V阳性、VI阴性

c、如选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统，可根据在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内沙门氏菌属的反应结果的初步判断结果，从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液，使用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行鉴定。

E、血清学鉴定

a、检查培养物有无自凝性

一般采用1.2%-1.5%琼脂培养物作为玻片凝集试验用的抗原。首先排除自凝集反应，在洁净的玻片上滴加一滴生理盐水，将待试培养物混合于生理盐水滴内，使成为均一性的混浊悬液，将玻片轻轻摇动30s-60s，在黑色背景下观察反应（必要时用放大镜观察），若出现可见的菌体凝集，即认为有自凝性，反之无自凝性。对无自凝的培养物参照下面方法进行血清学鉴定。

b、多价菌体抗原(O)鉴定

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在玻片上划出2个约1cm×2cm 的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴多价菌体(O)抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对照。再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌苔研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min，并对着黑暗背景进行观察，任何程度的凝集现象皆为阳性反应。O 血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2%-3%)培养基上再检查；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O 凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。

c、多价鞭毛抗原(H)鉴定

操作同多价菌体抗原(O)鉴定。H抗原发育不良时，将菌株接种在0.55%-0.65%半固体琼脂平板的中央，待菌落蔓延生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过接种装有0.3%-0.4%半固体琼脂的小玻管1次-2次，自远端取菌培养后再检查。

F、血清学分型（选做项目）

a、O 抗原的鉴定

用A-F多价O 血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。在生理盐水中自凝者为粗糙型菌株，不能分型。

被A-F多价O 血清凝集者，依次用O4；O3、O10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集试验。

根据试验结果，判定O 群。被O3、O10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集试验，判定E1、E4各亚群，每一个O 抗原成分的最后确定均应根据O 单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O 复合因子血清进行核对。

不被A-F多价O 血清凝集者，先用9种多价O 血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O 群血清逐一检查，以确定O 群。每种多价O 血清所包括的O 因子如下：

O 多价1 A，B，C，D，E，F群(并包括6，14群)

O 多价2 13，16，17，18，21群

O 多价3 28，30，35，38，39群

O 多价4 40，41，42，43群

O 多价5 44，45，47，48群

O 多价6 50，51，52，53群

O 多价7 55，56，57，58群

O 多价8 59，60，61，62群

O 多价9 63，65，66，67群

b、H 抗原的鉴定

属于A-F各O 群的常见菌型，H 因子血清检查第1相和第2相的H 抗原。

0群：

A：第1相：a 第2相：无

B：第1相：g，f，s 第2相：无

B：第1相：I，b，d 第2相：2

C1：第1相：k，v，r，c 第2相：5，z25

C2：第1相：b，d，r 第2相：2，5

D（不产气的）：第1相：d 第2相：无

D（产气的）：第1相：g，m，p，q 第2相：无

E1：第1相：h，v 第2相：6，w，x

E4：第1相：g，s，t 第2相：无

E4：第1相：I 第2相

不常见的菌型，先用8种多价H 血清检查，如有其中一种或两种血清凝集，则再用这一种或两种血清所包括的各种H 因子血清逐一检查，以第1相和第2项的H 抗原。8种多价H 血清所包括的H 因子如下：

H 多价1 a，b，c，d，i

H 多价2 eh，enx，enz15，g，gms，gpu，gp，gq，mt，gz51

H 多价3 k，r，y，z，z10，lv，lw，lz13，lz28，lz40

H 多价4 1，2；1，5；1，6；1，7；z6

H 多价5 z4z23，z4z24，z4z32，z29，z35，z36，z38

H 多价6 z39，z41，z42，z44

H 多价7 z52，z53，z54，z55

H 多价8 z56，z57，z60，z61，z62

每一个H 抗原成分的最后确定均应根据H 单因子血清的检查结果，没有H 单因子血清的要用两个H 复合因子血清进行核对。

检出第1相H 抗原而未检出第2相H 抗原的或检出第2相H 抗原而未检出第1相H 抗原的，可在琼脂斜面上移种1代-2代后再检查。如仍只检出一个相的H 抗原，要用位相变异的方法检查其另一个相。单相菌不必做位相变异检查。

位相变异试验方法如下：

小玻管法：将半固体管（每管约1mL-2mL）在酒精灯上溶化并冷至50℃，取已知相的H 因子血清0.05mL-0.1mL，加入于溶化的半固体内，混匀后，用毛细吸管吸取分装于供位相变异试验的小玻管内，待凝固后，用接种针挑取待检菌，接种于一端。将小玻管平放在平皿内，并在其旁放一团湿棉花，以防琼脂中水分蒸发而干缩，每天检查结果，待另一相细菌解离后，可以从另一端挑取细菌进行检查。

培养基内血清的浓度应有适当的比例，过高时细菌不能生长，过低时同一相细菌的动力不能抑制。一般按原血清1:200-1:800的量加入。

小倒管法：将两端开口的小玻管（下端开口要留一个缺口，不要平齐）放在半固体管内，小玻管的上端应高出于培养基的表面，灭菌后备用。临用时在酒精灯上加热溶化，冷至50℃，挑取因子血清1环，加入小套管中的半固体内，略加搅动，使其混匀，待凝固后，将待检菌株接种于小套管中的半固体表层内，每天检查结果，待另一相细菌解离后，可从套管外的半固体表面取菌检查，或转种1%软琼脂斜面，于36℃培养后再做凝集试验。

c、Vi抗原的鉴定

用Vi因子血清检查。已知具有Vi抗原的菌型有：伤寒沙门氏菌，丙型副伤寒沙门氏菌，都柏林沙门氏菌。

d、菌型的判定

根据血清学分型鉴定的结果，按照附录B或有关沙门氏菌属抗原表判定菌型。

3-4 结果与报告

综合以上生化试验和血清学鉴定的结果，报告25g（mL）样品中检出或未检出沙门氏菌。

3-5快速检测

用DNA和抗体技术在48h内检出沙门氏菌，通常称为快速检测。

随着生物实验技术的发展，沙门氏菌的检测和鉴定技术在不断的完善，可分三大类：常规生化鉴定方法、免疫学方法、分子生物学方法。

免疫学的发展为致病菌的快速检测提供了新方法，同时大大提高了致病菌检测的灵敏性和特异性。除了凝集实验、沉淀实验和补体实验等经典的免疫学检测方法，以免疫学方法为基础建立起来的检测技术，如酶联免疫技术、SPA协同凝集法也已应用于沙门氏菌的检测。

以分子生物学为基础建立的众多检测技术，如聚合酶链式反应、脉冲场凝胶电泳、RAPD技术、基因芯片等以其敏感、快速、高特异等特点成为生物技术革命的新产物，已经应用于食源性致病菌的检测。

常规生化检测须经过增殖培养、分离纯化、生化试验、血清学实验等步骤，具有直观、准确、稳定性好且假阳性率低等特点，一直被沿用至今。

虽然免疫学方法和分子生物学方法比常规生化检测具有检测快速和高特异性的优点，但对沙门氏菌的检测仍需要利用O多价血清及O因子血清、H多价血清及H因子血清和Vi因子血清进行菌型的鉴定。目前，沙门氏菌检验的国家标准推荐的方法仍为采用诊断血清进行血清学分型检验。因此，沙门氏菌属A-F群O多价诊断血清是检测沙门氏菌必需的首选试剂，在沙门氏菌的实际监测和检验中具有关键作用。

【预防措施】

该病是人、畜、禽共患病，尽量避免人、畜、禽频繁接触，以防人中毒感染。预防原则上杜绝病原的传入，消除群内的带菌者与慢性患者，同时，必须执行严格的卫生、消毒和隔离制度，进行综合性预防：

检疫净化措施，主要采取定期检疫，淘汰阳性鸡，净化鸡场措施，包括在饮水或饲料中添加抗生素；技术措施上，主要是执行检疫淘汰为主的综合措施，即发现和清除传染源，消灭场内病原和杜绝病原传入等三个环节。

1、挑选健康种鸡、种蛋。建立健康鸡群，坚持自繁自养，慎重从外地引进种蛋。在健康鸡群，每年春秋两季对种鸡定期用血清凝集试验全面主动监测检疫及不定期被动随机抽查检疫。对40-60天以上的中雏也要进行检疫，淘汰阳性鸡及可疑鸡。在有病鸡群，每隔2-4周主动监测检疫一次，经3-4次后一般可把带菌鸡全部检出淘汰，有时反复多次才能检出。

2、坚持种蛋孵化前消毒处理，孵化器也要经常进行消毒。孵化时用季胺类消毒剂喷雾消毒孵化前的种蛋，拭干后再入孵化。不安全鸡群的种蛋，不得进入孵化房。每次孵化前孵化房及所有用具，都要用甲醛消毒。对引进的鸡要注意隔离及检疫。

3、加强育雏饲养管理卫生，鸡舍及一切用具要注意经常清洁消毒。育雏室及运动场保持清洁干燥。饲料槽及饮水器每天清洗一次，防止被鸡粪污染。育雏室温度维持恒定，采取高温育雏，注意通风换气，避免过于拥挤，密度适宜，避免室温过低。饲料配合要适当，保证含有丰富的维生素A。不用孵化的废蛋喂鸡。防止雏鸡发生啄食癖。发现病雏，迅速隔离消毒。禽场范围内须防止飞禽或其他动物进入散播病原。

4、采用安全、无毒、不产生副作用、细菌不产生抗药性、价廉、有效等特性的药物进行预防。病原菌对热和常用的消毒药物敏感，一般消毒药(碱类、酚类、醛类、氯制剂、碘制剂等)可使之迅速灭活。

雏鸡出壳后的消毒及药物预防：

出雏消毒预防：雏鸡出壳后用福尔马林14ml/m³，高锰酸钾7g/m³，在出雏器中熏蒸15min。

雏鸡开饮净化：雏鸡初饮水温30℃以下，20-25℃最佳。1000ml水 + 50g葡萄糖 + 1g维生素C（或2片维生素Ｃ泡腾） + 0.1g高锰酸钾。水滴喂3-5滴，连饮2-3天。或1000ml水 + 100g葡萄糖 + 1g维生素C + 50mg恩诺沙星。自由饮水，连饮3-5天。或1000ml水 + 100g葡萄糖 + 9g氯化钠 + 50g环丙沙星。自由饮水，连饮3-5天。或10%葡萄糖 + 5％碳酸氢钠（或11.2％乳酸钠）+ 0.01%高锰酸钾。自由饮水，用饮2-3天。

雏鸡开食预防：

0.01%高锰酸钾水溶液喷洒少量饲料 + 5%葡萄糖 + 0.1%维生素C，拌匀配成混合糊液饲喂。连用3-5天。或新霉素260-350mg/kg饲料，拌匀混饲，连用2-3天。或饲料中拌入奎诺酮类抗生素，连用2-3天。还可加一些大蒜汁（碎末）或洋葱碎末或韭菜碎末。

雏鸡开食之日起，在饲料或饮水中添加抗菌药物，用0.01%高锰酸钾溶液作饮水2-3天。在易感日龄期间，用0.02%呋喃唑酮作饮水，或在雏鸡粉料中按0.02%比例拌入呋喃唑酮或按0.5%加入磺胺类。

有机酸预防：雏鸡出壳开食时，饲料中加0.4%的缓冲丙酸或0.25%的甲酸或0.36%的甲酸钙盐对鸡白痢沙门氏菌有很好的预防效果。

中草药预防：用苍术100g、川椒（花椒）50g、干姜50g、黄苓50g、白头翁50g等对鸡白痢沙门氏菌有明显的治疗效果。先将苍术用食醋50毫升浸泡30分钟，然后加入川椒、干姜、黄苓、白头翁，加水2000毫升，煮沸后文火煎15分钟取出药液，再加水1000毫升左右，每次500毫升，再加适量的水供雏鸡饮用，每日早晚各1次，连用7天。

药物预防注意：在饲料或饮水中添加药物的种类很多，因病原菌变异、耐药、假药等因素，很多药物效果不好或几乎完全无效；更因药物选择、用药方法方式、剂量、配伍、疗程、给药时间等因素，很多敏感有效的药物起不到防预与治疗的最佳效果。目前，新型奎诺酮类抗生素等药物防预与治疗效果都比较好。预防中不能一种药物长时间使用，更不要一味加大药物剂量达到防治目的，而是有效药物在一定时间内交替、轮换使用，药物剂量、用法要合理，防治要有一定的疗程。

【治疗方法】

病原菌变异及抗药性等因素，很多传统常用防治药物变的效果不好或几乎完全无效，有必要利用纸片法进行药敏试验，选择敏感性高的抗生素类、磺胺类、呋喃类、奎诺酮类等药物进行治疗。

病原菌对新霉素、先锋霉素、丁胺卡那霉素、氯霉素（禁用）、司氟沙星、氧氟沙星、双氟沙星、氟笨尼考、氟甲砜霉素、新霉素、普霉素、壮观霉素、泰妙菌素、盐酸多西环素等高敏，用于防治药物效果显著。对卡那霉素、庆大霉素、氟喹诺酮类、磺胺二甲基嘧啶等中敏。对土霉素、四环素、磺胺类（含增效磺胺）、青霉素、链霉素、恩诺沙星、环丙沙星、氟哌酸，痢特灵等低敏，用于防治药物作用很低，几乎完全无效。痢特灵有效但对鸡毒性大。

沙门氏菌属的药敏结果及临床治疗用药情况看，喹诺酮类抗生素如诺氟沙星、盐酸环丙沙星、盐酸氧氟沙星、盐酸左氧氟沙星等效果普通较好。其中，盐酸左氧氟沙星是目前喹诺酮类抗生素中对沙门氏菌属及多数致胃肠道感染细菌较强大的一种。

简要介绍几种治疗方案：

半乳糖醇注射液是治疗类风湿必不可少的药物,将半乳糖醇与溴化氢作用,可以制造1,6-二溴-1,6-二脱氧半乳糖醇,它是一种极好的细胞抑制剂,治疗脊髓白血病时,优于传统的1,6-二溴-1,6-二脱氧甘露糖醇,而且有效剂量明显。

1、氟苯尼考+新霉素+葡萄糖

混饲：氟苯尼考1g /10-20kg饲料，自由采食，首次加倍，拌料连用3-5天。拌料中再入新霉素260-350mg/kg饲料，效果更好。

混饮：氟苯尼考3-4g/100L水+5％葡萄糖，自由饮水，每天一次，连用3天，首次加倍，预防减半。

肌注：氟苯尼考15-20mg/kg体重，每隔48小一次，连用两次。

禁忌：氟苯尼考在产蛋期家禽禁用，勿与β-内酰胺类、氨基糖苷类、利福平等药物合用。

配伍：氟苯尼考和新霉素、盐酸多西环素、硫酸粘杆菌素、萝力素等配伍，疗效增强。氟苯尼考和氨苄西林、头孢拉定、头孢氨苄等配伍，疗效降低。氟苯尼考和卡那霉素、链霉素、磺胺类、喹诺酮类配伍，毒性增加。氟苯尼考和VB12配伍，会抑制红细胞生成。

2、盐酸多西环素

混饲：盐酸多西环素1g/kg饲料，连用3-5天。

混饮：盐酸多西环素每100g兑水100-200公斤，连用3-5天。